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臺(tái)式電鏡(尤其是臺(tái)式掃描電鏡)是一種重要的微觀觀測(cè)工具

 更新時(shí)間:2025-10-20 點(diǎn)擊量:151
  臺(tái)式電鏡能夠輕松達(dá)到納米級(jí)甚至亞納米級(jí)的分辨率,這使得科學(xué)家們能夠觀察到更加細(xì)微的微觀結(jié)構(gòu),為材料科學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域的研究提供了有力支持。相較于傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡,具有更大的景深,能夠同時(shí)清晰呈現(xiàn)樣品表面的高低起伏和復(fù)雜結(jié)構(gòu)。此外,通過(guò)調(diào)整電子束的掃描角度和收集信號(hào)的方式,還可以生成具有強(qiáng)立體感的圖像,讓觀察者仿佛置身于微觀世界之中。
 
  臺(tái)式電鏡的測(cè)定步驟:
 
  1.樣品準(zhǔn)備
 
  -采集與選取:根據(jù)研究目的從待測(cè)材料或生物組織中采集具有代表性的樣本。例如,在材料科學(xué)中,可能需要選取不同加工工藝下的金屬試樣;在生物學(xué)領(lǐng)域,則要挑選形態(tài)完整、結(jié)構(gòu)清晰的細(xì)胞或組織片段。所選樣品應(yīng)能準(zhǔn)確反映整體的特征和性質(zhì)。
 
  -固定處理:為了防止樣品在后續(xù)操作過(guò)程中發(fā)生變形、損壞或分解,通常需要進(jìn)行固定。常用的固定方法包括化學(xué)固定法,如使用戊二醛、多聚甲醛等試劑對(duì)生物樣品進(jìn)行交聯(lián)固定;對(duì)于某些特殊材料,也可能采用物理方法如低溫冷凍來(lái)保持其穩(wěn)定性。
 
  -脫水干燥:若樣品含有水分,會(huì)影響電子束的傳播和成像效果,因此需進(jìn)行脫水處理。一般先使用乙醇等有機(jī)溶劑梯度脫水,然后通過(guò)臨界點(diǎn)干燥儀或其他合適的干燥設(shè)備去除水分,使樣品處于干燥狀態(tài)。
 
  -導(dǎo)電性增強(qiáng)(可選):非導(dǎo)電性的樣品可能會(huì)因電荷積累而干擾圖像質(zhì)量,此時(shí)可對(duì)樣品表面噴鍍一層薄薄的金、鉑等金屬導(dǎo)電層,以提高其導(dǎo)電性,減少荷電效應(yīng)帶來(lái)的影響。
 
  2.安裝樣品
 
  -打開艙門:小心地打開電鏡的樣品艙門,注意避免碰撞到內(nèi)部的精密部件。
 
  -放置樣品:將準(zhǔn)備好的樣品放置在樣品臺(tái)上,并確保其位置穩(wěn)定且符合觀察要求。可以使用夾具、膠水等方式固定樣品,但要注意不要過(guò)度用力以免損壞樣品或樣品臺(tái)。
 
  -關(guān)閉艙門:確認(rèn)樣品安裝無(wú)誤后,緩慢關(guān)閉樣品艙門,并檢查密封是否良好,以保證真空環(huán)境的建立。
 
  3.抽真空
 
  -啟動(dòng)真空泵:按照儀器的操作說(shuō)明開啟真空泵系統(tǒng),開始抽取樣品室內(nèi)的空氣,逐漸降低氣壓至所需的真空度。這一過(guò)程可能需要一定時(shí)間,具體取決于儀器的性能和樣品的特性。
 
  -監(jiān)測(cè)真空度:在抽真空過(guò)程中,密切關(guān)注真空儀表的指示值,確保真空度達(dá)到適合觀察的條件。如果真空度不足,可能會(huì)導(dǎo)致電子束散射、圖像模糊等問(wèn)題。
 
  4.參數(shù)設(shè)置與調(diào)整
 
  -加速電壓選擇:根據(jù)樣品的性質(zhì)和觀察需求選擇合適的加速電壓。較高的加速電壓可以提高分辨率,但也可能會(huì)對(duì)某些敏感樣品造成損傷;較低的加速電壓則適用于對(duì)易受損樣品的觀察,但分辨率相對(duì)較低。
 
  -探針電流調(diào)節(jié):合理設(shè)置探針電流大小,以獲得適當(dāng)?shù)男盘?hào)強(qiáng)度和信噪比。過(guò)大的電流可能會(huì)導(dǎo)致樣品過(guò)熱、放電等問(wèn)題,而過(guò)小的電流則會(huì)使圖像信號(hào)較弱,影響觀察效果。
 
  -工作距離確定:調(diào)整物鏡與樣品之間的距離,即工作距離,優(yōu)化聚焦效果和景深。不同的工作距離會(huì)對(duì)圖像的清晰度、對(duì)比度產(chǎn)生影響,需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。
 
  -掃描模式設(shè)定:根據(jù)觀察目的選擇合適的掃描模式,如面掃描、線掃描等,以及相應(yīng)的掃描速度和范圍。
 
  5.觀察與成像
 
  -粗調(diào)聚焦:先使用粗調(diào)旋鈕大致找到樣品的清晰圖像位置,然后再進(jìn)行精細(xì)調(diào)節(jié),使圖像達(dá)到良好聚焦?fàn)顟B(tài)。在調(diào)節(jié)過(guò)程中,可以從低倍率逐步向高倍率過(guò)渡,以便更好地定位和觀察目標(biāo)區(qū)域。
 
  -微調(diào)參數(shù)優(yōu)化圖像:根據(jù)圖像的質(zhì)量進(jìn)一步微調(diào)各項(xiàng)參數(shù),如亮度、對(duì)比度、色彩平衡等,以獲得更清晰、準(zhǔn)確的微觀結(jié)構(gòu)和形貌信息。同時(shí),可以利用圖像分析軟件對(duì)采集到的圖像進(jìn)行處理和測(cè)量,提取有用的數(shù)據(jù)。
 
  6.數(shù)據(jù)記錄與保存
 
  -拍攝照片或視頻:當(dāng)觀察到滿意的圖像時(shí),及時(shí)按下拍照按鈕拍攝照片或錄制視頻,記錄下重要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。確保拍攝的角度、視野范圍等符合實(shí)驗(yàn)要求。
 
  -標(biāo)注信息:為每張圖片或視頻添加詳細(xì)的標(biāo)注信息,包括樣品編號(hào)、放大倍數(shù)、加速電壓、工作距離等關(guān)鍵參數(shù),以及觀察日期、操作者姓名等,方便后續(xù)的數(shù)據(jù)管理和分析。
 
  -導(dǎo)出數(shù)據(jù):將采集到的數(shù)據(jù)導(dǎo)出到外部存儲(chǔ)設(shè)備或其他數(shù)據(jù)分析軟件中進(jìn)行進(jìn)一步的處理和研究。

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